产品介绍

结直肠癌类器官完全培养基是一款用于培养人类结直肠癌类器官的商品化培养基。患者来源的癌症类器官再现了原始肿瘤的基因组和病理特征，在医学研究和精准医学方面具有良好的应用前景。

产品信息

产品组成	货号	规格	储存条件及周期
Colorectal Cancer Organoid Complete Medium A	CROM-P100	100 mL	4℃，6个月
Colorectal Cancer Organoid Complete Medium B (50×)	CROM-P100	1 mL × 2	-20℃，1年
Colorectal Cancer Organoid Complete Medium C (250×)	CROM-P100	0.4 mL	-20℃，1年
Colorectal Cancer Organoid Complete Medium D (100×)	CROM-P100	1 mL	-20℃，1年

结直肠癌类器官完全培养基的制备

在无菌条件下配制结直肠癌类器官完全培养基。以下是准备10 mL完全培养基的示例，如所需量不同，请进行相应用量调整。

1. 冰上解冻Colorectal Cancer Organoid Complete Medium B (50×) ，Colorectal Cancer Organoid Complete Medium C (250×)和Colorectal Cancer Organoid Complete Medium D (100×)。

注意：解冻后，建议将Colorectal Cancer Organoid Complete Medium B (50×)，Colorectal Cancer Organoid Complete Medium C (250×)和Colorectal Cancer Organoid Complete Medium D (100×)按需分装后保存取用，避免反复冻融。

2. 将200 μL Colorectal Cancer Organoid Complete Medium B (50×)，40 μL Colorectal Cancer Organoid Complete Medium C (250×), 100 μL Colorectal Cancer Organoid Complete Medium D (100×)加至9.66 mL Colorectal Cancer Organoid Complete Medium A中，充分混合，配制成10 mL结直肠癌类器官完全培养基。

注意：配制后的结直肠癌类器官完全培养基可在2-8℃储存，建议在两周内使用。Colorectal Cancer Organoid Complete A内含有细菌及真菌抗生素。

附录1 结直肠癌类器官培养过程图

图1. 结直肠癌类器官原代（P0）培养生长过程示例。（A）在生长至第3天时，可观察到明显的3D细胞球；（B）继续生长至第6天，类器官体积逐渐增大，呈空泡囊状结构；（C）在生长至第9天时，直径可达到300 μm，部分类器官呈致密结构，并可见褶皱。比例尺：100 μm。

图2. 结直肠癌类器官首次传代后（P1）生长过程示例。（A）经消化传代后的结直肠癌类器官生长状态良好；（B）生长至第3天时体积明显增加，且形态不规则；（C）继续生长至第5天时，类器官直径可达300 μm。比例尺：100 μm。

附录2 结直肠癌类器官组织染色鉴定图

图3. 结直肠癌组织和类器官HE染色。由图可见结直肠癌组织（A）和结直肠癌类器官（B）内细胞内核质比近似，且类器官中有中空的内腔，表现出一致的特异性聚集形态，说明类器官和来源组织在组织形态上相似。放大倍数：200×，比例尺：50 μm。注：HE染色后细胞核呈现蓝紫色，细胞质和细胞外基质呈现红色。

图4. 结直肠癌类器官免疫荧光染色。（A）CK7（腺癌标志物）和β-catenin（Wnt通路活化标志物）的免疫荧光染色。（B）E-cadherin（肠上皮细胞标志物）和Ki67（细胞增殖标志物）的免疫荧光染色。DAPI（蓝色）标记细胞核。放大倍数：400×，比例尺：20 μm。

其他需准备的试剂信息

试剂名称	厂家	货号
类器官专用基质胶	SHRbio	OEM-10
样本保存液	SHRbio	SPS-100
肿瘤组织消化液	SHRbio	TTD-50
肿瘤类器官基础培养基	SHRbio	TBM-500
类器官传代消化液	SHRbio	OPD-100
类器官润洗液	SHRbio	OMR-100
红细胞裂解液	-	-