产品介绍

小鼠小肠类器官完全培养基是一款用于建立和维持小鼠肠道成体干细胞来源小肠类器官的完全培养基。生长在该完全培养基中的小鼠小肠类器官主要由干细胞、肠祖细胞和肠绒毛细胞、潘氏细胞、杯状细胞和少量肠内分泌细胞组成，在自我更新能力、组织结构、细胞类型和功能方面，小鼠小肠类器官重现了体内小肠上皮的特征，因此是肠道稳态和疾病机制研究的理想体外模型。

产品信息

产品组成	货号	规格	储存条件及周期
Mouse Intestinal Organoid Complete Medium A	MICM-100	100 mL	4℃，6个月
Mouse Intestinal Organoid Complete Medium B (50×)	MICM-100	1 mL × 2	-20℃，1年
Mouse Intestinal Organoid Complete Medium C (250×)	MICM-100	0.4 mL	-20℃，1年
EDTA (0.5M) PH 8.0	OET200	0.2 mL	15-30℃，5年

小鼠小肠类器官完全培养基的制备

使用无菌操作技术配制小鼠小肠类器官完全培养基。以下是准备10 mL完全培养基的示例，如所需量不同，可相应调整用量。

1. 冰上解冻Mouse Intestinal Organoid Complete Medium B (50×)和Mouse Intestinal Organoid Complete Medium C (250×)。

注意：解冻后，建议将Mouse Intestinal Organoid Complete Medium B (50×)和Mouse Intestinal Organoid Complete Medium C (250×)分别分装后保存取用，避免反复冻融。

2. 将200 μL Mouse Intestinal Organoid Complete Medium B (50×)，40 μL Mouse Intestinal Organoid Complete Medium C (250×)加至9.76 mL Mouse Intestinal Organoid Complete Medium A中，充分混合，配制成10 mL小鼠小肠类器官完全培养基。

注意：配制后的小鼠小肠类器官完全培养基可在2-8°C储存，建议在两周内使用。Mouse Intestinal Organoid Complete A内含有细菌及真菌抗生素。

附录1 小鼠小肠组织消化后示意图

图1. 消化处理后的隐窝结构和肠绒毛碎片观察。*为隐窝结构，#为肠绒毛碎片。

附录2 小鼠小肠类器官培养过程图

图2. 小鼠小肠类器官原代（P0）培养生长过程示例。（A）在生长至第2天时，可观察到隐窝形成闭合薄壁囊泡；（B）继续生长至第5天，囊泡直径明显增大。比例尺：100 μm。

图3. 小鼠小肠类器官首次传代后（P1）生长过程示例。（A）在生长至第2天时，可观察到明显的出芽；（B）继续生长至第3天，出芽增多且状态较好，可进行传代。比例尺：100 μm。

附录3 小鼠小肠类器官免疫荧光鉴定图

图4. 免疫荧光观察小鼠小肠类器官中的细胞组成。Villin（绿色）为肠绒毛标记物，Muc2（红色）为杯状细胞标记物，E-cadherin（红色）为肠上皮细胞标记物，Lyz（绿色）为潘氏细胞标记物，DAPI（蓝色）用于标记细胞核。比例尺：20 μm。

其他需准备的试剂信息

试剂名称	厂家	货号
类器官专用基质胶	SHRbio	OEM-10
上皮类器官基础培养基	SHRbio	OBM-500
类器官传代消化液	SHRbio	OPD-100
类器官润洗液	SHRbio	OMR-100
红细胞裂解液	-	-
DPBS（不含钙镁离子）	-	-