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小鼠气道类器官完全培养基是一款用于建立和维持源自小鼠气道干细胞的气道类器官的商品化培养基。气道上皮的自我更新是由基底干细胞的增殖驱动的。小鼠气道类器官包含基底细胞、纤毛细胞、分泌细胞和少数神经内分泌细胞,因此在结构、细胞类型组成和自我更新动力学方面表现出气道上皮的所有特征,在气道发育和疾病的研究中具有良好的应用前景。
产品组成 | 货号 | 规格 | 储存条件及周期 |
---|---|---|---|
Mouse Airway Organoid Complete Medium A | MACM-100 | 100 mL | 4℃,6个月 |
Mouse Airway Organoid Complete Medium B (50×) | MACM-100 | 1 mL × 2 | -20℃,1年 |
Mouse Airway Organoid Complete Medium C (250×) | MACM-100 | 0.4 mL | -20℃,1年 |
在无菌条件下制备小鼠气道类器官完全培养基。以下是准备10 mL完全培养基的示例,如所需量不同,请进行相应用量调整。
1. 冰上解冻Mouse Airway Organoid Complete Medium B (50×)和Mouse Airway Organoid Complete Medium C (250×)。
注意:解冻后,建议将Mouse Airway Organoid Complete Medium B (50×)和Mouse Airway Organoid Complete Medium C (250×)按需分装后保存取用,避免反复冻融。
2. 将200 μL Mouse Airway Organoid Complete Medium B (50×),40 μL Mouse Airway Organoid Complete Medium C (250×)加至9.76 mL Mouse Airway Organoid Complete Medium A中,充分混合,配制成10 mL小鼠气道类器官完全培养基。
注意:配制后的小鼠气道类器官完全培养基可在2-8℃储存,建议在两周内使用。Mouse Airway Organoid Complete A内含有细菌及真菌抗生素。
图1. 小鼠气道类器官原代(P0)培养过程示例。(A)接种当天可见活性细胞团;(B)生长至第2天时,可观察到闭合囊泡;(C)继续生长至第5天,囊泡直径明显增大。比例尺:100 μm。
图2. 小鼠气道类器官首次传代后(P1)生长过程示例。(A)传代当天可见活性细胞团;(B)生长至第1天时,可观察到明显的囊泡结构;(C)继续生长至第6天,囊泡直径明显增大,且状态较好,可继续进行传代。比例尺:100 μm。
图3. 小鼠气道类器官HE染色。HE染色结果显示,小鼠气道类器官中央空腔,具有极化、分层的气道上皮结构,其中含有基底细胞、分泌细胞和纤毛细胞等。比例尺:50 μm。
图4. 免疫荧光观察小鼠气道类器官中的细胞组成。KRT5(红色)为基底细胞标志物,acetylated α-tubulin(绿色)为纤毛细胞标志物,DAPI(蓝色)用于标记细胞核。比例尺:50 μm。
试剂名称 | 厂家 | 货号 |
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类器官专用基质胶 | SHRbio | OEM-10 |
正常组织消化液 | SHRbio | NTD-50 |
上皮类器官基础培养基 | SHRbio | OBM-500 |
类器官传代消化液 | SHRbio | OPD-100 |
类器官润洗液 | SHRbio | OMR-100 |
红细胞裂解液 | - | - |
DPBS(不含钙镁离子) | - | - |
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