产品介绍

HiPSC中脑类器官试剂盒是一款专为诱导人诱导多能干细胞（hiPSC）定向分化为中脑类器官而开发的实验试剂。本试剂盒可支持在体外高效构建100个以上的中脑类器官，其细胞组成，结构与功能特性与体内中脑相似，为神经退行性疾病建模，多巴胺能神经元功能研究，以及中枢神经细胞药物开发提供了高度仿生的三维研究体系。

产品信息

产品组成	货号	规格	储存条件及周期
Human iPSC-Derived Neural lineage Induction Medium	HiMBO-K500	100 mL	4℃，6个月
Supplement A (1000×)	HiMBO-K500	0.5 mL	4℃，6个月
Supplement B (1000×)	HiMBO-K500	0.1 mL	-20℃，1年
Supplement C (25×)	HiMBO-K500	4 mL	-20℃，1年
Human iPSC-Derived Midbrain Organoid Differentiation Medium	HiMBO-K500	100 mL	4℃，6个月
Supplement D (25×)	HiMBO-K500	2 mL	-20℃，1年
Supplement E (25×)	HiMBO-K500	2 mL	-20℃，1年
Human iPSC-Derived Midbrain Organoid Maturity Medium	HiMBO-K500	300 mL	4℃，6个月
Supplement F (25×)	HiMBO-K500	12 mL	-20℃，1年

HiPSC中脑类器官完全培养基的制备

在无菌条件下制备HiPSC中脑类器官完全培养基。以下是准备将hiPSC诱导为中脑类器官的神经谱系诱导培养基a、神经谱系诱导培养基b、中脑类器官分化培养基a、中脑类器官分化培养基b、中脑类器官成熟培养基的示例，如所需量不同，请进行相应用量调整。

1、 冰上解冻Supplement A (1000×)，Supplement B (1000×)，Supplement C (25×)，Supplement D (25×)，Supplement E (25×)，Supplement F (25×)。

注意：解冻后，建议将Supplement A (1000×)，Supplement B (1000×)，Supplement C (25×)，Supplement D (25×)，Supplement E (25×)，Supplement F (25×)按需分装后保存取用，避免反复冻融。

2、将10 μL Supplement A (1000×) ，10 μL Supplement B (1000×)和400 μL Supplement C (25×)加至9.6 mL Human iPSC-Derived Neural lineage Induction Medium中，充分混合，配制成10 mL神经谱系诱导培养基a（仅第一天种96孔板时使用）。

3、将10 μL Supplement A (1000×)和400 μL Supplement C (25×)加至9.6 mL Human iPSC-Derived Neural lineage Induction Medium中，充分混合，配制成10 mL神经谱系诱导培养基b。

4、将10 μL Supplement A (1000×)和400 μL Supplement D (25×)加至9.6 mL Human iPSC-Derived Midbrain Organoid Differentiation Medium中，充分混合，配制成10 mL中脑类器官分化培养基a。

5、将10 μL Supplement A (1000×)，400 μL Supplement E (25×)和Matrigel基质胶（5%体积比）加至9.6 mL Human iPSC-Derived Midbrain Organoid Differentiation Medium中，充分混合，配制成10 mL中脑类器官分化培养基b。

6、将10 μL Supplement A (1000×)，400 μL Supplement F (25×)和Matrigel基质胶（1%体积比）加至9.6 mL Human iPSC-Derived Midbrain Organoid Maturity Medium中，充分混合，配制成10 mL中脑类器官成熟培养基。

注意：配制后的培养基可在2-8℃储存，配置好的培养基尽量3天内用完，建议最好现配现用。Human iPSC-Derived Neural lineage Induction Medium、Human iPSC-Derived Midbrain Organoid Differentiation Medium和Human iPSC-Derived Midbrain Organoid Maturity Medium内含有细菌及真菌抗生素。

附录1 HiPSC中脑类器官构建流程

图1. hiPSC中脑类器官构建流程图。比例尺：100 μm。

其他需准备的试剂信息

试剂名称	厂家	货号
hiPSC完全培养基	STEM CELL	85850
hiPSC培养专用基质胶	CORNING	354277
hiPSC细胞解离液	Gibco	12605010
Matrigel基质胶	CORNING	356231
类器官润洗液	SHRbio	OMR-100
DPBS	-	-